Table 2

PCR and sequencing primers used in pyrosequence analysis for the DNA-methylation assay

SequenceCpG dinucleotides
γ-globin   
    Set 1   
        PCR primer1 TTGATAAGGTAAATTTGATTAATAGTTTTA na 
        PCR primer2 CCTCCTCTATAAAATAACCCATAAC na 
    Set 2   
        PCR primer1 GAGTATTTAGTGAGGTTAGGGG na 
        PCR primer2 Biotin-ATACTTCCTTTTATTCTTCATCCC na 
        Sequencing primer ATTTAGTGAGGTTAGGGG −54 and −51 
    Set 3   
        PCR primer1 Biotin-TTGGTTAGGGATGAAGAATAAAAG na 
        PCR primer2 CCTCCTCTATAAAATAACCCATAA na 
        Sequencing primer1 AAAACTTATTAATAACCTCA +5 and +16 
        Sequencing primer2 TCCTCTATAAAATAACCCAT +49 
β-globin   
    Set 4   
        PCR primer1 GTGTAATAAGAAAATTGGGAAAA na 
        PCR primer2 Biotin-ATATCTCTTAACCCCATACCATCA na 
        Sequencing primer1 TGTAATAAGAAAATTGGGAA −306 
        Sequencing primer2 AGTTGTGATTTTAAATATTA −265 
    Set 5   
        Forward GGGTTGAGGGTTTGAAGTTTAATT na 
        Reverse Biotin-CCAACCCTAAAATATAACTCCACA na 
        Sequencing primer AGAAGAGTTAAGGATAGGTA −125 
SequenceCpG dinucleotides
γ-globin   
    Set 1   
        PCR primer1 TTGATAAGGTAAATTTGATTAATAGTTTTA na 
        PCR primer2 CCTCCTCTATAAAATAACCCATAAC na 
    Set 2   
        PCR primer1 GAGTATTTAGTGAGGTTAGGGG na 
        PCR primer2 Biotin-ATACTTCCTTTTATTCTTCATCCC na 
        Sequencing primer ATTTAGTGAGGTTAGGGG −54 and −51 
    Set 3   
        PCR primer1 Biotin-TTGGTTAGGGATGAAGAATAAAAG na 
        PCR primer2 CCTCCTCTATAAAATAACCCATAA na 
        Sequencing primer1 AAAACTTATTAATAACCTCA +5 and +16 
        Sequencing primer2 TCCTCTATAAAATAACCCAT +49 
β-globin   
    Set 4   
        PCR primer1 GTGTAATAAGAAAATTGGGAAAA na 
        PCR primer2 Biotin-ATATCTCTTAACCCCATACCATCA na 
        Sequencing primer1 TGTAATAAGAAAATTGGGAA −306 
        Sequencing primer2 AGTTGTGATTTTAAATATTA −265 
    Set 5   
        Forward GGGTTGAGGGTTTGAAGTTTAATT na 
        Reverse Biotin-CCAACCCTAAAATATAACTCCACA na 
        Sequencing primer AGAAGAGTTAAGGATAGGTA −125 

na indicates not applicable.

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