Table 2

ELISPOT assay before and after short-term expansion

ReplicatePrame 100
Prame 142
Peptide-specific ELISPOTs (spots/million PBMCs)
GP100/CAP-1–6D
CMV
Prame 300
Prame 425
No peptide
D1/D7D1D7D1D7D1D7D1D7D1D7D1D7
AML 
    1 6/6 NEG 21 ± 6 NEG 28 ± 7 131 ± 11 72 ± 15 NEG NEG 3 3 NEG NEG 330 ± 36 3500 ± 550 
    7 5/5 NEG NEG NEG NEG NEG NEG NEG NEG 80 1 590 NEG NEG NEG NEG 
    10 6/6 NEG 1410 ± 145 26 ± 6 230 ± 65 280 ± 60 550 ± 60 NEG 137 ± 45 2 50 NEG 660 ± 80 180 ± 52 7000 ± 165 
ALL 
    21 5/5 NEG 1300 ± 65 NEG 2100 ± 35 2460 ± 40 > 14 300 NEG 2500 ± 40 110 760 NEG 960 ± 90 1000 ± 110 ND 
    22 5/5 NEG NEG NEG 80 ± 23 NEG NEG NEG 150 ± 30 1 23 NEG 88 ± 31 25 ± 5 ND 
    23 5/5 NEG NEG NEG NEG NEG NEG NEG NEG 2 12 NEG NEG NEG NEG 
    24 5/5 NEG 1150 ± 200 NEG 3400 ± 360 NEG 3200 ± 290 NEG NEG 24 320 36 ± 8 NEG 2950 ± 170 ND 
    25 5/5 NEG NEG NEG NEG NEG 660 ± 110 NEG 220 ± 60 18 95 NEG NEG 540 ± 105 ND 
CML 
 6/6 NEG NEG NEG NEG NEG 110 ± 20 NEG NEG 70 65 NEG NEG NEG 282 ± 96 
 6/6 NEG 28 ± 8 NEG NEG NEG NEG NEG NEG 16 16 NEG NEG 77 ± 26 205 ± 10 
 6/6 NEG 2100 ± 300 NEG 2180 ± 180 NEG 550 ± 110 NEG 2220 ± 190 110 100 NEG 330 ± 100 NEG NEG 
Donors 
    31 5/5 NEG NEG NEG NEG 176 ± 27 NEG NEG NEG 150 135 NEG NEG NEG NEG 
    35 5/5 NEG NEG NEG 980 ± 44 103 ± 40 NEG NEG NEG 77 130 NEG NEG 303 ± 39 > 3800 
    41 5/5 NEG NEG NEG NEG NEG NEG NEG NEG 38 775  NEG 167 ± 94 ND 
    42 4/5 NEG NEG NEG NEG 99 ± 22 1630 ± 83 NEG NEG 81 1126 NEG NEG NEG NEG 
ReplicatePrame 100
Prame 142
Peptide-specific ELISPOTs (spots/million PBMCs)
GP100/CAP-1–6D
CMV
Prame 300
Prame 425
No peptide
D1/D7D1D7D1D7D1D7D1D7D1D7D1D7
AML 
    1 6/6 NEG 21 ± 6 NEG 28 ± 7 131 ± 11 72 ± 15 NEG NEG 3 3 NEG NEG 330 ± 36 3500 ± 550 
    7 5/5 NEG NEG NEG NEG NEG NEG NEG NEG 80 1 590 NEG NEG NEG NEG 
    10 6/6 NEG 1410 ± 145 26 ± 6 230 ± 65 280 ± 60 550 ± 60 NEG 137 ± 45 2 50 NEG 660 ± 80 180 ± 52 7000 ± 165 
ALL 
    21 5/5 NEG 1300 ± 65 NEG 2100 ± 35 2460 ± 40 > 14 300 NEG 2500 ± 40 110 760 NEG 960 ± 90 1000 ± 110 ND 
    22 5/5 NEG NEG NEG 80 ± 23 NEG NEG NEG 150 ± 30 1 23 NEG 88 ± 31 25 ± 5 ND 
    23 5/5 NEG NEG NEG NEG NEG NEG NEG NEG 2 12 NEG NEG NEG NEG 
    24 5/5 NEG 1150 ± 200 NEG 3400 ± 360 NEG 3200 ± 290 NEG NEG 24 320 36 ± 8 NEG 2950 ± 170 ND 
    25 5/5 NEG NEG NEG NEG NEG 660 ± 110 NEG 220 ± 60 18 95 NEG NEG 540 ± 105 ND 
CML 
 6/6 NEG NEG NEG NEG NEG 110 ± 20 NEG NEG 70 65 NEG NEG NEG 282 ± 96 
 6/6 NEG 28 ± 8 NEG NEG NEG NEG NEG NEG 16 16 NEG NEG 77 ± 26 205 ± 10 
 6/6 NEG 2100 ± 300 NEG 2180 ± 180 NEG 550 ± 110 NEG 2220 ± 190 110 100 NEG 330 ± 100 NEG NEG 
Donors 
    31 5/5 NEG NEG NEG NEG 176 ± 27 NEG NEG NEG 150 135 NEG NEG NEG NEG 
    35 5/5 NEG NEG NEG 980 ± 44 103 ± 40 NEG NEG NEG 77 130 NEG NEG 303 ± 39 > 3800 
    41 5/5 NEG NEG NEG NEG NEG NEG NEG NEG 38 775  NEG 167 ± 94 ND 
    42 4/5 NEG NEG NEG NEG 99 ± 22 1630 ± 83 NEG NEG 81 1126 NEG NEG NEG NEG 

In all subjects, cross-reactivity was excluded by testing responses against the irrelevant peptides, GP100 or CAP1–6D. The absolute number of INF-γ spots from negative control wells (T2 cells with no peptide) is included. A T-cell response was defined as positive if there was a minimum of 20 peptide-specific spots in 106 PBMCs (after subtracting the number of spots in negative control wells), if the number of spots in peptide-exposed PBMCs was 2-fold or more higher than the number of spots the number of spots in negative control wells and statistically significantly different from the control by Student t test (P < .05). The mean plus or minus SEM values in positive wells represent spot numbers after subtracting the number of spots in negative control wells. The figures in bold represent positive CD8+ T-cell responses to stimulation with PRAME peptide.

D1 indicates assays performed prior to in vitro expansion; D7, assays performed after 7 days of in vitro expansion; and ND, not done.

View Large
Close Modal
This Feature Is Available To Subscribers Only

or Create an Account

Close Modal
Close Modal